- 産品品牌： REAGEN
- 産品貨号： RND99131
- 産品規格： 48/96T
- 産品适用： 适用于利福平檢測
- 産地來源： 中國深圳
- 試劑盒組成： 檢測試劑、說明書
- 保質期： 12個月
本測試盒用競争免疫分析法定量測定細胞培養液中的利福平。該測試盒反應孔可拆卸，可測單份樣品，也可測多份樣品。定量分析時需有含450nm波長的微孔闆酶标儀。
1 概要
利福平（Rifampicin）一種廣譜抗生素藥物，對結核杆菌有較強抗菌作用，對革蘭氏陽性或陰性細菌、病毒等也有療效，主要用于治療結核病、腦膜炎和金黃色葡萄球菌感染，外用可治療沙眼等。
2 測定原理
本測試盒利用固相酶聯免疫吸附原理，采用間接競争ELISA法進行測定。用抗原包被微孔闆，加入利福平标準品或樣品、抗利福平酶标單克隆抗體進行免疫反應後，将未與包被抗原結合的抗體洗去；再加入酶标記的抗鼠IgG抗體孵育，加入顯色液，經終止液終止後，用酶标儀在450nm處測定OD值。
3 提供的物品
微孔闆
6個濃度的标準溶液（各0.5mL）
标準1：0ng/mL ……………………………………………………………........直接使用
标準2：1.0ng/mL ………………………………………………………................直接使用
标準3：2.0ng/mL ……………………………………………………........…........直接使用
标準4：5.0ng/mL ……………………………………………………........…........直接使用
标準5：20.0ng/mL ………………………………………………………........直接使用
标準6：50.0ng/mL …………………………………………………….......….直接使用
抗體溶液(6mL) …………………………………………………………………直接使用
酶标物(12mL) …………………………………………………………………直接使用
顯色液(12mL) …………………………………………………………………直接使用
終止液(6mL) ………………………………………………………………………直接使用
10X濃縮洗液(30mL) ……………………………………………………………稀釋使用
4 盒中未提供，需自備物品
微孔闆酶标儀（含450nm）、去離子水或蒸餾水。
5 操作者注意事項
終止液為0.5M硫酸，避免接觸皮膚。每次加樣後立即将所有試劑放回2~8 ℃。每步加樣時間應控制在5min内。孵育過程中應避光。不要使用過期試劑盒。不要交叉使用不同批号的試劑盒中的試劑。
6 儲存條件
保存試劑盒于2~8℃。不要冷凍
顯色液對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
将不用的微孔闆放進原鋁箔袋中，置2~8℃保存。
7 試劑變質的标志
标準1的吸光度值小于0.5個單位（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質。
8 樣品處理
----細胞培養液無需前處理，直接進行測定
9 酶免疫分析程序
----濃縮洗液為10倍濃縮液，使用時與去離子水或蒸餾水按體積比1:9稀釋後使用。
----取所需數量的闆條插入微孔架，記錄樣品及标準的位置。
----加入50mL标準品或處理好的樣品到微孔，每個标準和樣品必須使用新的吸頭。
----加入50mL利福平單克隆抗體溶液到每個微孔中（注意移液器管尖不要接觸到孔中的液體，避免交叉污染），37℃孵育90min。
----甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔闆5次，最後一次應在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。
----每孔加入酶标物100mL，37℃孵育60min。
----甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔闆5次，最後一次應在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。
----每孔加入顯色液100mL，37℃孵育15 min。
----每孔加入終止液50mL，立即用酶标儀在波長450nm處測定吸光度值（OD值）。
10 樣品濃度計算
以标準溶液OD值與标準1的OD值的比值為縱坐标，所對應标準溶液濃度（ng/mL）的對數值為橫坐标，制作标準曲線。根據樣品OD值與标準1的OD的比值，可從曲線上得到對應點的橫坐标，即為利福平濃度的對數值，求得反對數即為測定液中利福平濃度C（ng/mL）
11 主要技術指标及參數
11.1 最低檢出濃度1.0 ng/mL。
11.2 加标回收率在70-120%，條内變異系數＜10%，條件變異系數＜15%。